| 目的 应用miRNA芯片技术筛选高糖环境下人视网膜血管内皮细胞(Human retinal capillary endothelial cells, HRCECs)差异表达的miRNA，并预测部分差异表达的miRNA调控的靶基因，为进一步探讨miRNA在糖尿病性视网膜病变(Diabetic retinopathy, DR)发病机制中的作用打下基础。方法 常规培养HRCECs，用高糖作为刺激因子，用In Situ Cell Death Detection 试剂盒对细胞进行凋亡检测；提取细胞的总RNA并进行质检；miRNA芯片检测差异表达的miRNA，并用实时定量PCR对部分差异表达的miRNA进行验证，运用生物信息学方法预测它们可能调控的靶基因。结果 miRNA芯片结果显示与正常对照组相比，在高糖组一共筛选出49个差异性表达的miRNAs(上调>2倍或下调<0.5倍)，其中表达上调的31个，表达下调的18个。对表达上调的has-miR-320c和has-miR-29a*进行实时定量PCR检测，表达趋势与芯片结果一致，靶基因预测结果表明这些差异表达的miRNA作用靶点非常广泛，其中涉及到不少生长因子和蛋白。结论 运用miRNA芯片技术发现部分miRNA在高糖刺激下的HRCECs中存在差异表达，它们可能通过调控其靶基因参与DR的发生发展。
基金项目：四川省教育厅基金（08ZA092），2009年泸州医学院重点项目
作者单位：646000 泸州医学院附属医院眼科
通讯作者：吕红彬(Email: oculistlvhongbin@163.com) |
