目的 研究聚乙二醇400滴眼液(思然)对体外培养人角膜上皮细胞生物学特性的影响及分子机制。
方法 用DMEM/F12培养基将聚乙二醇400滴眼液分别稀释到0.8%、4%、20%的浓度。采用三种稀释度聚乙二醇400滴眼液分别培养人角膜上皮细胞,倒置显微镜观察并照相记录细胞培养24h、48h、72h时形态;四甲基偶氮唑蓝法检测角膜上皮细胞生长曲线;流式细胞仪检测角膜上皮细胞细胞周期;RT-PCR检测角膜上皮细胞中碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子基因表达水平。
结果 三种稀释度聚乙二醇400滴眼液对角膜上皮细胞细胞形态无影响,各组及正常对照组细胞形态均呈典型的多角形。MTT及细胞周期结果显示,稀释度4%、0.8%聚乙二醇400滴眼液对体外培养HCECs的生长有促进作用。稀释度0.8%聚乙二醇400滴眼液培养HCECs后bFGF和EGF的基因表达水平比空白对照组高。
结论 低稀释度聚乙二醇400滴眼液可能通过缩短HCECs的细胞周期和促进HCECs释放bFGF、EGF,从而加速HCECs增殖。 |