Usher综合征是最常见一种由于基因突变而造成失明和失聪。其中II型是最常见的类型,大约占所有病例的70%。USH2A,USH2C和USH2D三个基因缺陷会导致USH2。在本次研究中,我们证明了espin和USH2D(whirlin基因编码蛋白)的直接关系。 方法 用转染和免疫共沉淀实验方法证明Whirlin与Espin的相互作用,经过cytochalasin D 处理细胞后,Whirlin与Espin的相互作用增加了四倍。 结果 Whirlin与Espin的相互作用我们用重组的whirlin和GFP荧光蛋白标记espin在HEK293里细胞进行免疫共沉淀实验,我们发现这两个蛋白部分共定位。在espin单独转染的细胞里,我们用phalloidin染色,结果发现espin与肌动蛋白束偶联在一起。而在espin和whirlin共同转染的细胞里,但是,在这些espin /肌动蛋白束里,whirlin则表现出非常弱的信号。这表明当espin和actin微丝偶联在一起时,whirlin则与espin不存在相互作用关系。我们发现用cytochalasin D 处理细胞后, GFP标记espin蛋白的量在免疫共沉淀实验中增加了四倍。从而更加充分的证实了这样的一个观点:当espin与actin微丝不结合的时候,whirlin和espin存在相互作用。 结论 Cytochalasin D增加Whirlin与Espin的相互作用
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