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Cytochalasin D增加Whirlin与Espin的相互作用
作者:宋鄂  文章来源:吉林大学第一医院  点击数278  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

Usher综合征是最常见一种由于基因突变而造成失明和失聪。其中II型是最常见的类型,大约占所有病例的70%USH2A,USH2CUSH2D三个基因缺陷会导致USH2。在本次研究中,我们证明了espinUSH2Dwhirlin基因编码蛋白)的直接关系。
方法 用转染和免疫共沉淀实验方法证明WhirlinEspin的相互作用,经过cytochalasin D 处理细胞后WhirlinEspin的相互作用增加了四倍。
结果 WhirlinEspin的相互作用我们用重组的whirlinGFP荧光蛋白标记espinHEK293细胞进行免疫共沉淀实验我们发现这两个蛋白部分共定位。espin单独转染的细胞里我们用phalloidin染色结果发现espin与肌动蛋白束偶联在一起。而在espinwhirlin共同转染的细胞里,但是,在这些espin /肌动蛋白束里,whirlin则表现出非常弱的信号。这表明当espinactin微丝偶联在一起时,whirlin则与espin不存在相互作用关系。我们发现用cytochalasin D 处理细胞后, GFP标记espin蛋白的量在免疫共沉淀实验中增加了四倍。从而更加充分的证实了这样的一个观点:当espinactin微丝不结合的时候,whirlinespin存在相互作用。
结论 Cytochalasin D增加WhirlinEspin的相互作用

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