目的 研究抑癌基因P53及其表达产物P53蛋白在不同年龄组的人晶体上皮细胞(LECs)中的表达情况,探讨P53表达与晶体上皮细胞凋亡和增殖的相关性。
方法 收集手术切除的不同年龄组的人晶体囊膜或晶体标本42例,应用链霉菌亲生物素蛋白—过氧化物酶免疫组织化学(SP)染色测定P53蛋白和细胞增殖核抗原(PCNA)的表达情况;应用DNA末端转移酶介导的Bio-dUTP原位末端标记技术(TUNEL)作凋亡细胞的定量检测;应用核酸分子原位杂交法检测P53mRNA的表达情况;并分别定义凋亡指数和增殖指数。对P53基因及P53蛋白表达与细胞凋亡和细胞增殖进行相关性研究。
结果 1、P53蛋白在正常胚胎组的LECs中几乎无表达(阳性率<0.01%),在儿童白内障组和老年白内障组的LECs中其阳性表达率分别为1.21%~3.25%,12.83%~19.15%,两组之间有显著性差异(P<0.01)。2、PCNA在15例儿童白内障组的LECs中均见PCNA阳性表达,显著高于老年白内障组(13.64%)(3/22)(P<0.01)。3、5例正常胚胎组的LECs中几乎未见凋亡细胞,儿童白内障组和老年白内障组的LECs中凋亡细胞阳性检出率分别为1.52%~3.36%,26.16%~27.80%,老年组显著高于儿童组(P<0.01)。 4、正常胚胎组的LECs中P53mRNA阳性表达率极低(阳性率<0.01%),在儿童白内障组和老年白内障组其阳性表达率分别为2.89%~5.05%,18.44%~20.10%,两组之间有显著性差异(P<0.01)。5、人LECs中凋亡指数AI和增殖指数PI之间无明显相关性(P>0.05),P53蛋白与AI呈显著正相关(γ=0.900,P<0.01),与PI呈显著负相关(γ=-0.807,P<0.01)。
结论 白内障患者LECs中有P53蛋白高表达,且保持野生型P53蛋白促凋亡的作用,提示P53基因可能参与LECs凋亡的调控,有望作为治疗PCO的外源性侯选基因。
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