目的 探讨不同光照形式对豚鼠视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Ca2+浓度的影响。
方法 2周龄幼年健康豚鼠10只,体外培养RPE细胞,传代、鉴定后,将细胞分为维拉帕米(verapamil,Ver)处理部分和未处理部分,Ver处理部分加入80mg/LVer作用12小时。两部分均进一步分为聚焦光组、离焦光组、平行光组和空白对照组,前三组分别接受聚焦光、离焦光(均为将平行光经透镜转化)和平行光照射,空白对照组不接受照射。于照射后立即采用激光扫描共焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)测定细胞内Ca2+荧光强度;分析不同光照形式与效应的关系。统计学方法采用单因素方差分析。
结果 Ver可降低RPE细胞内Ca2+荧光强度,浓度为20 mg/、40 mg/、80mg/L时分别降低了10.36%、24.54%、58.05%,仅80mg/L组与无光照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。未加Ver对RPE细胞进行光照,聚焦光组的Ca2+荧光强度较其他各组明显升高,离焦光组的荧光强度也较高,组间比较有统计学差异(P<0.05)。加入80mg/L Ver对RPE细胞作用12h后再进行光照,光照各组Ca2+荧光强度没有明显提高,组间比较没有统计学差异(P>0.05)。
结论 1.超过一定浓度的Ver可诱导RPE细胞凋亡,80mg/L可在不引起RPE细胞凋亡的前提下有效降低细胞内Ca2+荧光强度;2.不同光照形式对豚鼠RPE细胞内Ca2+有明显刺激作用,聚焦光影响最大。3.不同光照形式对Ver处理的RPE细胞内的Ca2+荧光强度无明显作用。 |